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實驗操作-小鼠麻醉實驗方法

動物福利要求進行小鼠手術操作前對手術可能造成的疼痛等級進行評估,對於疼痛等級達D級的手術需要給小鼠施以麻醉和鎮痛。目前市面上可以用於小鼠麻醉的藥劑有很多,但是存活手術需要考慮的不僅僅是藥劑的麻醉效果,還需關註藥劑本身的安全性、刺激性等等,所以麻醉劑的選用往往是一件比較令人頭疼的事情。

➤ 麻醉劑分類

小鼠麻醉劑按照使用方式可以分為吸入類、註射類。

01.吸入類

吸入類麻醉劑如異氟烷、七氟烷等,不僅需要專用的設備,還需考慮操作時麻醉氣體逸散對人員的負面影響。雖然具備快速、安全的優點,但高昂的成本和潛在的人員安全風險,往往不會作為小鼠首選的麻醉方式。

02.註射類

註射類麻醉劑相互之間的差異也比較大,安全性也不盡相同。例如水合氯醛,雖然其有較好的鎮靜催眠作用,但因其對粘膜的強刺激性和對呼吸道的不良影響,以及較小的安全范圍,現在已經漸漸不被科研工作者們使用。

巴比妥類的戊巴比妥鈉和苯巴比妥那雖然起效快且維持期長,但他們對呼吸系統和心血管系統明顯的抑制作用,在肝臟代謝類、呼吸系統研究實驗中,不建議使用。

➤ 常用麻醉方式

實驗中常用的麻醉方式是不同麻醉劑聯用,通過藥物的聯用解決單一麻醉劑麻醉的常見問題,提高麻醉效果、減少麻醉劑使用量或是提高麻醉操作的安全性。

比較常見的有氯胺酮和甲苯噻嗪聯用,甲苯噻嗪的加入,能有效提高氯胺酮麻醉的穩定性。目前應用較多的註射用麻醉劑是舒泰50,它本身就是鎮靜劑與麻醉劑的聯用藥。舒泰在小動物尤其是犬貓臨床中的麻醉效果非常好,安全性也高,但是在應用到小鼠時,麻醉效果會變得不穩定。為瞭應對這種情況,我們選擇鹽酸賽拉嗪與其聯用,可以降低麻醉時的個體差異。

小鼠註射藥物聯用麻醉劑

➤ 麻醉中的註意事項

在實施小鼠麻醉時,有哪些註意點呢?

首先應確定的,是麻醉劑的濃度,如果濃度過高會引起不必要的刺激,甚至造成動物的死亡;而若濃度過低,又會讓藥物的註射體積增加,對於小鼠而言,單次大體積的註射,也是致命的。

其次便是深度麻醉狀態確認和麻醉狀態下下小鼠的保溫瞭。深麻狀態我們以呼吸均勻、無夾趾疼痛反射、無角膜反射為標準,而若手術過程中小鼠出現尿失禁或劇烈抽搐,則說明麻醉劑量過大,小鼠麻醉過深瞭。另一方面,在麻醉狀態下小鼠的體溫調節中樞被抑制,不能自行調節體溫,小鼠很容易在環境中失溫死亡。所以麻醉狀態下的小鼠應放在熱臺,並在手術結束,小鼠完全蘇醒後方可放回籠架。

小鼠麻醉後放熱臺

另外,冬天時,麻醉劑應在使用前預熱至小鼠體溫。同時麻醉過程中應隨時檢查小鼠狀態,觀察其角膜反射、呼吸、心跳、疼痛反射、肌肉張力等指標,避免小鼠於手術過程中死亡。

根據實驗目的以及疼痛等級選擇合適的麻醉方式及聯用藥物,保障動物福利,提高手術操作安全性,可獲得更穩定可靠的實驗數據。

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